Широкое использование синтетических пестицидов привело ко многим проблемам, включая появление устойчивых организмов, деградацию окружающей среды и вред для здоровья человека. Поэтому необходимы новые микробные средства.пестицидыСрочно необходимы биосурфактанты, безопасные для здоровья человека и окружающей среды. В данном исследовании для оценки токсичности для личинок комаров (Culex quinquefasciatus) и термитов (Odontotermes obesus) использовался биосурфактант рамнолипид, продуцируемый Enterobacter cloacae SJ2. Результаты показали дозозависимый уровень смертности между вариантами обработки. Значение LC50 (50% летальная концентрация) через 48 часов для биосурфактантов личинок термитов и комаров было определено с использованием метода нелинейной регрессионной аппроксимации кривой. Результаты показали, что значения LC50 за 48 часов (95% доверительный интервал) ларвицидной и антитермитной активности биосурфактанта составили 26,49 мг/л (диапазон от 25,40 до 27,57) и 33,43 мг/л (диапазон от 31,09 до 35,68) соответственно. Согласно гистопатологическому исследованию, обработка биосурфактантами вызвала серьезное повреждение органелл тканей личинок и термитов. Результаты данного исследования указывают на то, что микробный биосурфактант, продуцируемый Enterobacter cloacae SJ2, является отличным и потенциально эффективным средством для борьбы с Cx quinquefasciatus и O. obesus.
В тропических странах наблюдается большое количество заболеваний, передаваемых комарами1. Значимость заболеваний, передаваемых комарами, очень высока. Ежегодно от малярии умирает более 400 000 человек, а в некоторых крупных городах наблюдаются эпидемии серьезных заболеваний, таких как денге, желтая лихорадка, чикунгунья и Зика2. Заболевания, передаваемые переносчиками, связаны с каждой шестой инфекцией в мире, причем комары являются причиной наиболее значительных случаев3,4. Culex, Anopheles и Aedes — три рода комаров, наиболее часто ассоциирующиеся с передачей заболеваний5. Распространенность лихорадки денге, инфекции, передаваемой комаром Aedes aegypti, за последнее десятилетие возросла и представляет собой серьезную угрозу для общественного здравоохранения4,7,8. По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), более 40% населения мира подвержено риску заболевания лихорадкой денге, при этом ежегодно в более чем 100 странах регистрируется от 50 до 100 миллионов новых случаев9,10,11. Лихорадка денге стала серьезной проблемой общественного здравоохранения, поскольку ее заболеваемость во всем мире возросла12,13,14. Комар Anopheles gambiae, широко известный как африканский комар рода Anopheles, является наиболее важным переносчиком малярии у человека в тропических и субтропических регионах15. Вирус Западного Нила, энцефалит Сент-Луиса, японский энцефалит и вирусные инфекции лошадей и птиц передаются комарами рода Culex, которых часто называют обычными домашними комарами. Кроме того, они также являются переносчиками бактериальных и паразитарных заболеваний16. В мире существует более 3000 видов термитов, и они существуют уже более 150 миллионов лет17. Большинство вредителей живут в почве и питаются древесиной и древесными продуктами, содержащими целлюлозу. Индийский термит Odontotermes obesus является важным вредителем, наносящим серьезный ущерб важным сельскохозяйственным культурам и плантационным деревьям18. В сельскохозяйственных районах заражение термитами на разных стадиях может нанести огромный экономический ущерб различным культурам, видам деревьев и строительным материалам. Термиты также могут вызывать проблемы со здоровьем у человека19.
Проблема устойчивости микроорганизмов и вредителей в современной фармацевтической и сельскохозяйственной отраслях сложна20,21. Поэтому обеим компаниям следует искать новые экономически эффективные противомикробные препараты и безопасные биопестициды. Синтетические пестициды уже доступны и, как было показано, обладают инфекционными свойствами и отпугивают полезных насекомых, не являющихся целевыми объектами22. В последние годы исследования биосурфактантов расширились благодаря их применению в различных отраслях промышленности. Биосурфактанты очень полезны и важны в сельском хозяйстве, рекультивации почв, добыче нефти, удалении бактерий и насекомых, а также в пищевой промышленности23,24. Биосурфактанты, или микробные поверхностно-активные вещества, — это химические вещества, вырабатываемые микроорганизмами, такими как бактерии, дрожжи и грибы, в прибрежных местообитаниях и нефтезагрязненных районах25,26. Химически полученные поверхностно-активные вещества и биосурфактанты — это два типа веществ, получаемых непосредственно из природной среды27. Различные биосурфактанты получают из морских местообитаний28,29. Поэтому ученые ищут новые технологии для производства биосурфактантов на основе природных бактерий30,31. Достижения в таких исследованиях демонстрируют важность этих биологических соединений для защиты окружающей среды32. Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium и эти роды бактерий являются хорошо изученными представителями23,33.
Существует множество типов биосурфактантов с широким спектром применения34. Значительным преимуществом этих соединений является то, что некоторые из них обладают антибактериальной, ларвицидной и инсектицидной активностью. Это означает, что их можно использовать в сельском хозяйстве, химической, фармацевтической и косметической промышленности35,36,37,38. Поскольку биосурфактанты, как правило, биоразлагаемы и экологически безопасны, они используются в программах интегрированной защиты растений от вредителей39. Таким образом, были получены базовые знания об ларвицидной и антитермитной активности микробных биосурфактантов, продуцируемых Enterobacter cloacae SJ2. Мы исследовали смертность и гистологические изменения при воздействии различных концентраций рамнолипидных биосурфактантов. Кроме того, мы оценили широко используемую компьютерную программу количественной структуры-активности (QSAR) и экологической структуры-активности (ECOSAR) для определения острой токсичности для микроводорослей, дафний и рыб.
В данном исследовании изучалась антитермитная активность (токсичность) очищенных биосурфактантов в различных концентрациях от 30 до 50 мг/мл (с интервалом 5 мг/мл) против индийских термитов O. obesus и четвертого вида. Личинки Cx. Личинки комаров quinquefasciatus. Концентрации биосурфактантов LC50 в течение 48 часов против O. obesus и Cx. C. solanacearum. Личинки комаров идентифицировались с помощью метода нелинейной регрессионной аппроксимации кривой. Результаты показали, что смертность термитов увеличивалась с увеличением концентрации биосурфактанта. Результаты показали, что биосурфактант обладает ларвицидной активностью (рис. 1) и антитермитной активностью (рис. 2), со значениями LC50 через 48 часов (95% ДИ) 26,49 мг/л (25,40–27,57) и 33,43 мг/л (рис. 31,09–35,68) соответственно (табл. 1). С точки зрения острой токсичности (48 часов), биосурфактант классифицируется как «вредный» для исследуемых организмов. Биосурфактант, полученный в данном исследовании, показал превосходную ларвицидную активность со 100% смертностью в течение 24–48 часов после воздействия.
Рассчитайте значение LC50 для ларвицидной активности. Нелинейная регрессионная аппроксимация кривой (сплошная линия) и 95% доверительный интервал (заштрихованная область) для относительной смертности (%).
Рассчитайте значение LC50 для противотермитной активности. Нелинейная регрессионная аппроксимация кривой (сплошная линия) и 95% доверительный интервал (заштрихованная область) для относительной смертности (%).
В конце эксперимента под микроскопом были обнаружены морфологические изменения и аномалии. Морфологические изменения наблюдались в контрольной и экспериментальной группах при 40-кратном увеличении. Как показано на рисунке 3, у большинства личинок, обработанных биосурфактантами, наблюдалось нарушение роста. На рисунке 3а показана нормальная личинка Cx. quinquefasciatus, на рисунке 3б — аномальная личинка Cx. causes пять нематод.
Влияние сублетальных (LC50) доз биосурфактантов на развитие личинок Culex quinquefasciatus. Изображение (а) нормальной кутикулы при 40-кратном увеличении, полученное с помощью световой микроскопии. (б) Аномальная кутикулы. Вызывает появление пяти личинок нематод.
В настоящем исследовании гистологическое изучение обработанных личинок (рис. 4) и термитов (рис. 5) выявило ряд аномалий, включая уменьшение площади брюшка и повреждение мышц, эпителиальных слоев и кожи средней кишки. Гистология позволила установить механизм ингибирующего действия биосурфактанта, использованного в данном исследовании.
Гистопатология нормальных необработанных личинок 4-й стадии развития Cx quinquefasciatus (контроль: (a,b)) и обработанных биосурфактантом (обработка: (c,d)). Стрелками указаны обработанный эпителий кишечника (epi), ядра (n) и мышцы (mu). Масштабная линейка = 50 мкм.
Гистопатология нормальных необработанных клеток O. obesus (контроль: (a,b)) и клеток, обработанных биосурфактантом (лечение: (c,d)). Стрелками указаны кишечный эпителий (epi) и мышцы (mu) соответственно. Масштабная линейка = 50 мкм.
В данном исследовании программа ECOSAR использовалась для прогнозирования острой токсичности рамнолипидных биосурфактантов для первичных продуцентов (зеленых водорослей), первичных потребителей (водяных блох) и вторичных потребителей (рыб). Эта программа использует сложные количественные модели зависимости структуры от активности для оценки токсичности на основе молекулярной структуры. Модель использует программное обеспечение для расчета зависимости структуры от активности (SAR) для определения острой и долгосрочной токсичности веществ для водных видов. В частности, в таблице 2 приведены оценочные средние летальные концентрации (LC50) и средние эффективные концентрации (EC50) для нескольких видов. Предполагаемая токсичность была разделена на четыре уровня с использованием Глобально гармонизированной системы классификации и маркировки химических веществ (таблица 3).
Борьба с болезнями, передаваемыми переносчиками, особенно с штаммами комаров и комаров рода Aedes, является сложной задачей для египтян 40,41,42,43,44,45,46. Хотя некоторые химически доступные пестициды, такие как пиретроиды и органофосфаты, в некоторой степени полезны, они представляют значительный риск для здоровья человека, включая диабет, репродуктивные расстройства, неврологические расстройства, рак и респираторные заболевания. Более того, со временем эти насекомые могут приобрести к ним устойчивость13,43,48. Таким образом, эффективные и экологически чистые методы биологического контроля станут более популярным способом борьбы с комарами49,50. Бенелли51 предположил, что ранний контроль комаров-переносчиков будет более эффективен в городских районах, но не рекомендовал использовать ларвициды в сельской местности52. Том и др.53 также предположили, что борьба с комарами на стадии личинки будет безопасной и простой стратегией, поскольку они более чувствительны к средствам контроля54.
Производство биосурфактантов мощным штаммом (Enterobacter cloacae SJ2) продемонстрировало стабильную и многообещающую эффективность. В нашем предыдущем исследовании сообщалось, что Enterobacter cloacae SJ2 оптимизирует производство биосурфактантов с использованием физико-химических параметров26. Согласно их исследованию, оптимальными условиями для производства биосурфактантов потенциальным изолятом E. cloacae были инкубация в течение 36 часов, перемешивание со скоростью 150 об/мин, pH 7,5, 37 °C, соленость 1 ppt, 2% глюкозы в качестве источника углерода, 1% дрожжей. Экстракт использовался в качестве источника азота для получения 2,61 г/л биосурфактанта. Кроме того, биосурфактанты были охарактеризованы с помощью ТСХ, ИК-спектроскопии и MALDI-TOF-MS. Это подтвердило, что рамнолипид является биосурфактантом. Гликолипидные биосурфактанты являются наиболее интенсивно изучаемым классом других типов биосурфактантов55. Они состоят из углеводных и липидных частей, главным образом из цепей жирных кислот. Среди гликолипидов основными представителями являются рамнолипид и софоролипид56. Рамнолипиды содержат две рамнозные части, связанные с моно- или ди-β-гидроксидекановой кислотой57. Использование рамнолипидов в медицинской и фармацевтической промышленности хорошо известно58, помимо их недавнего применения в качестве пестицидов59.
Взаимодействие биосурфактанта с гидрофобной областью дыхательного сифона позволяет воде проходить через его устьичную полость, тем самым увеличивая контакт личинок с водной средой. Присутствие биосурфактантов также влияет на трахею, длина которой близка к поверхности, что облегчает личинкам ползание к поверхности и дыхание. В результате поверхностное натяжение воды уменьшается. Поскольку личинки не могут прикрепиться к поверхности воды, они падают на дно резервуара, нарушая гидростатическое давление, что приводит к чрезмерным затратам энергии и гибели от утопления38,60. Аналогичные результаты были получены Гриби61, где биосурфактант, продуцируемый Bacillus subtilis, проявил ларвицидную активность против Ephestia kuehniella. Аналогично, ларвицидная активность Cx. Дас и Мукерджи23 также оценили влияние циклических липопептидов на личинки quinquefasciatus.
Результаты данного исследования касаются ларвицидной активности рамнолипидных биосурфактантов против комаров рода Cx. Уничтожение комаров вида quinquefasciatus согласуется с ранее опубликованными результатами. Например, используются биосурфактанты на основе сурфактина, продуцируемые различными бактериями рода Bacillus и Pseudomonas spp. В некоторых ранних отчетах64,65,66 сообщалось об активности липопептидных биосурфактантов из Bacillus subtilis23, уничтожающих личинки. Дипали и др.63 обнаружили, что рамнолипидный биосурфактант, выделенный из Stenotropomonas maltophilia, обладает мощной ларвицидной активностью при концентрации 10 мг/л. Сильва и др.67 сообщили об ларвицидной активности рамнолипидного биосурфактанта против комаров рода Ae при концентрации 1 г/л. Aedes aegypti. Канакданде и др. В работе 68 сообщалось, что липопептидные биосурфактанты, продуцируемые Bacillus subtilis, вызывали общую смертность личинок Culex и термитов при использовании липофильной фракции эвкалипта. Аналогично, Масендра и др. 69 сообщили о смертности рабочих муравьев (Cryptotermes cynocephalus Light.) в 61,7% при использовании липофильных фракций н-гексана и этилацетата из неочищенного экстракта E.
Партипан и др. (70) сообщили об использовании инсектицидных липопептидных биосурфактантов, продуцируемых Bacillus subtilis A1 и Pseudomonas stutzeri NA3, против Anopheles Stephensi, переносчика малярийного паразита Plasmodium. Они наблюдали, что личинки и куколки жили дольше, имели более короткий период откладки яиц, были стерильны и имели более короткую продолжительность жизни при обработке различными концентрациями биосурфактантов. Наблюдаемые значения LC50 для биосурфактанта B. subtilis A1 составили 3,58, 4,92, 5,37, 7,10 и 7,99 мг/л для разных стадий развития личинок (т.е. личинки I, II, III, IV стадии и стадия куколки) соответственно. Для сравнения, концентрация биосурфактантов для личиночных стадий I-IV и куколочных стадий Pseudomonas stutzeri NA3 составляла 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 и 6,99 мг/л соответственно. Задержка фенологии выживших личинок и куколок, как полагают, является результатом значительных физиологических и метаболических нарушений, вызванных обработкой инсектицидами71.
Штамм Wickerhamomyces anomalus CCMA 0358 продуцирует биосурфактант со 100% ларвицидной активностью против комаров Aedes aegypti. 24-часовой интервал 38 был выше, чем сообщалось в работе Silva et al. Было показано, что биосурфактант, полученный из Pseudomonas aeruginosa с использованием подсолнечного масла в качестве источника углерода, убивает 100% личинок в течение 48 часов 67. Abinaya et al.72 и Pradhan et al.73 также продемонстрировали ларвицидное или инсектицидное действие поверхностно-активных веществ, продуцируемых несколькими изолятами рода Bacillus. В ранее опубликованном исследовании Senthil-Nathan et al. было установлено, что 100% личинок комаров, подвергшихся воздействию растительных лагун, вероятно, погибли. 74.
Оценка сублетального воздействия инсектицидов на биологию насекомых имеет решающее значение для программ интегрированной борьбы с вредителями, поскольку сублетальные дозы/концентрации не убивают насекомых, но могут сократить популяции насекомых в будущих поколениях, нарушая их биологические характеристики10. Сикейра и др.75 наблюдали полную ларвицидную активность (100% смертность) биосурфактанта рамнолипида (300 мг/мл) при тестировании в различных концентрациях от 50 до 300 мг/мл. Личиночная стадия штаммов Aedes aegypti. Они проанализировали влияние времени до смерти и сублетальных концентраций на выживаемость личинок и их плавательную активность. Кроме того, они наблюдали снижение скорости плавания через 24–48 часов после воздействия сублетальных концентраций биосурфактанта (например, 50 мг/мл и 100 мг/мл). Считается, что яды, обладающие многообещающими сублетальными свойствами, более эффективны в нанесении множественного вреда подвергшимся воздействию вредителям76.
Гистологические наблюдения наших результатов показывают, что биосурфактанты, продуцируемые Enterobacter cloacae SJ2, значительно изменяют ткани личинок комаров (Cx. quinquefasciatus) и термитов (O. obesus). Аналогичные аномалии, вызванные препаратами базиликового масла у An. gambiaes.s и An. arabica, были описаны Охолой77. Камарадж и др.78 также описали те же морфологические аномалии у личинок An. Stephanie, подвергнутых воздействию наночастиц золота. Васанта-Сринивасан и др.79 также сообщили, что эфирное масло пастушьей сумки сильно повредило камеру и эпителиальные слои Aedes albopictus. Рагхавендран и др. сообщили, что личинки комаров, обработанные 500 мг/мл мицелиального экстракта местного гриба Penicillium, демонстрируют серьезные гистологические повреждения. aegypti и Cx. Уровень смертности 80. Ранее Абинайя и др. изучали личинки четвертой стадии An. Стивенси и Ae. aegypti обнаружили многочисленные гистологические изменения у Aedes aegypti, обработанных экзополисахаридами B. licheniformis, включая слепую кишку желудка, атрофию мышц, повреждение и дезорганизацию ганглиев нервных волокон72. По данным Рагхавендрана и др., после обработки экстрактом мицелия P. daleae клетки средней кишки исследованных комаров (личинки 4-й стадии) демонстрировали набухание просвета кишечника, уменьшение межклеточного содержимого и дегенерацию ядер81. Аналогичные гистологические изменения наблюдались у личинок комаров, обработанных экстрактом листьев эхинацеи, что указывает на инсектицидный потенциал обработанных соединений50.
Использование программного обеспечения ECOSAR получило международное признание82. Современные исследования показывают, что острая токсичность биосурфактантов ECOSAR для микроводорослей (C. vulgaris), рыб и водяных блох (D. magna) попадает в категорию «токсичности», определенную Организацией Объединенных Наций83. Экотоксикологическая модель ECOSAR использует SAR и QSAR для прогнозирования острой и долгосрочной токсичности веществ и часто используется для прогнозирования токсичности органических загрязнителей82,84.
Параформальдегид, фосфатный буфер натрия (pH 7,4) и все остальные химические вещества, использованные в этом исследовании, были приобретены в компании HiMedia Laboratories, Индия.
Производство биосурфактантов проводилось в колбах Эрленмейера объемом 500 мл, содержащих 200 мл стерильной среды Бушнелла-Хааса, дополненной 1% сырой нефти в качестве единственного источника углерода. Предварительная культура Enterobacter cloacae SJ2 (1,4 × 10⁴ КОЕ/мл) была инокулирована и культивировалась на орбитальном шейкере при 37°C, 200 об/мин в течение 7 дней. После инкубационного периода биосурфактант экстрагировали центрифугированием культуральной среды при 3400×g в течение 20 мин при 4°C, а полученный супернатант использовали для скрининга. Процедуры оптимизации и характеристики биосурфактантов были заимствованы из нашего предыдущего исследования²⁶.
Личинки комара Culex quinquefasciatus были получены из Центра передовых исследований в области морской биологии (CAS), Паланчипетай, Тамилнад (Индия). Личинки выращивали в пластиковых контейнерах, заполненных деионизированной водой, при температуре 27 ± 2 °C и фотопериоде 12:12 (свет:темнота). Личинок комаров кормили 10%-ным раствором глюкозы.
Личинки Culex quinquefasciatus были обнаружены в открытых и незащищенных септических резервуарах. Используйте стандартные классификационные правила для идентификации и культивирования личинок в лаборатории85. Испытания ларвицидной активности проводились в соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения86. SH. Личинки четвертой стадии развития quinquefasciatus собирали в закрытые пробирки группами по 25 мл и 50 мл с воздушным зазором, составляющим две трети их объема. В каждую пробирку индивидуально добавляли биосурфактант (0–50 мг/мл) и хранили при 25 °C. В контрольной пробирке использовали только дистиллированную воду (50 мл). Мертвыми считались личинки, которые не проявляли признаков плавания в течение инкубационного периода (12–48 часов)87. Рассчитайте процент смертности личинок, используя уравнение (1)88.
Семейство Odontotermitidae включает индийского термита Odontotermes obesus, обнаруженного в гниющих бревнах на территории сельскохозяйственного кампуса (Университет Аннамалай, Индия). Для определения вредности этого биосурфактанта (0–50 мг/мл) были проведены стандартные исследования. После сушки в ламинарном потоке воздуха в течение 30 минут каждая полоска бумаги Whatman была покрыта биосурфактантом в концентрации 30, 40 или 50 мг/мл. Предварительно покрытые и непокрытые полоски бумаги были протестированы и сравнены в центре чашки Петри. Каждая чашка Петри содержала около тридцати активных термитов O. obesus. Контрольным и экспериментальным термитам давали влажную бумагу в качестве источника пищи. Все чашки Петри хранились при комнатной температуре в течение всего периода инкубации. Термиты погибали через 12, 24, 36 и 48 часов89,90. Затем уравнение 1 было использовано для оценки процента смертности термитов при различных концентрациях биосурфактанта. (2).
Образцы хранили на льду, упаковывали в микропробирки, содержащие 100 мл 0,1 М фосфатного буфера натрия (pH 7,4), и отправляли в Центральную лабораторию патологии аквакультуры (CAPL) Центра аквакультуры им. Раджива Ганди (RGCA), гистологическую лабораторию, Сиркали, округ Майиладутхурай, Тамил Наду, Индия, для дальнейшего анализа. Образцы немедленно фиксировали в 4% параформальдегиде при 37°C в течение 48 часов.
После фазы фиксации материал трижды промывали 0,1 М фосфатным буфером натрия (pH 7,4), поэтапно обезвоживали в этаноле и выдерживали в смоле LEICA в течение 7 дней. Затем вещество помещали в пластиковую форму, заполненную смолой и полимеризатором, и помещали в печь, нагретую до 37°C, до полного полимеризации блока, содержащего вещество.
После полимеризации блоки разрезали на срезы толщиной 3 мм с помощью микротома LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation, 10399 Enterprise Dr., Davisburg, MI 48350, США). Срезы группировали на предметных стеклах, по шесть срезов на каждом. Предметные стекла высушивали при комнатной температуре, затем окрашивали гематоксилином в течение 7 минут и промывали проточной водой в течение 4 минут. Кроме того, на кожу наносили раствор эозина на 5 минут и промывали проточной водой в течение 5 минут.
Острая токсичность прогнозировалась с использованием водных организмов из разных тропических регионов: 96-часовая LC50 для рыб, 48-часовая LC50 для D. magna и 96-часовая EC50 для зеленых водорослей. Токсичность рамнолипидных биосурфактантов для рыб и зеленых водорослей оценивалась с помощью программного обеспечения ECOSAR версии 2.2 для Windows, разработанного Агентством по охране окружающей среды США (доступно онлайн по адресу https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Все тесты на ларвицидную и антитермитную активность проводились в трех повторениях. Для расчета медианной летальной концентрации (LC50) с 95% доверительным интервалом была выполнена нелинейная регрессия (логарифм переменных зависимости доза-эффект) данных о смертности личинок и термитов, а кривые зависимости концентрация-эффект были построены с использованием программы Prism® (версия 8.0, GraphPad Software Inc., США) 84, 91.
Настоящее исследование раскрывает потенциал микробных биосурфактантов, продуцируемых Enterobacter cloacae SJ2, в качестве ларвицидных и противотермитных средств против комаров, и эта работа будет способствовать лучшему пониманию механизмов ларвицидного и противотермитного действия. Гистологические исследования личинок, обработанных биосурфактантами, показали повреждение пищеварительного тракта, средней кишки, коры головного мозга и гиперплазию эпителиальных клеток кишечника. Результаты: Токсикологическая оценка противотермитной и ларвицидной активности рамнолипидного биосурфактанта, продуцируемого Enterobacter cloacae SJ2, показала, что этот изолят является потенциальным биопестицидом для борьбы с трансмиссивными заболеваниями комаров (Cx quinquefasciatus) и термитов (O. obesus). Необходимо понять лежащую в основе токсичность биосурфактантов для окружающей среды и их потенциальное воздействие на окружающую среду. Данное исследование предоставляет научную основу для оценки экологического риска биосурфактантов.
Дата публикации: 09.04.2024