Широкое использование синтетических пестицидов привело ко многим проблемам, включая появление резистентных организмов, ухудшение состояния окружающей среды и вред здоровью человека.Поэтому остро необходимы новые микробные пестициды, безопасные для здоровья человека и окружающей среды.В этом исследовании рамнолипидный биосурфактант, продуцируемый Enterobacter cloacae SJ2, использовался для оценки токсичности для личинок комаров (Culex quinquefasciatus) и термитов (Odontotermes obesus).Результаты показали, что между обработками наблюдался дозозависимый уровень смертности.Значение LC50 (50% летальной концентрации) через 48 часов для биосурфактантов личинок термитов и комаров определяли с использованием метода аппроксимации кривой нелинейной регрессии.Результаты показали, что 48-часовые значения LC50 (95% доверительный интервал) ларвицидной и антитермитной активности биосурфактанта составили 26,49 мг/л (диапазон от 25,40 до 27,57) и 33,43 мг/л (диапазон от 31,09 до 35,68) соответственно.По данным гистопатологического исследования, обработка биосурфактантами вызывала тяжелые повреждения тканей органелл личинок и термитов.Результаты этого исследования показывают, что микробный биосурфактант, продуцируемый Enterobacter cloacae SJ2, является отличным и потенциально эффективным средством контроля Cx.quinquefasciatus и O. obesus.
В тропических странах наблюдается большое количество заболеваний, передающихся комарами1.Актуальность болезней, передающихся комарами, широко распространена.Ежегодно от малярии умирают более 400 000 человек, а в некоторых крупных городах наблюдаются эпидемии таких серьезных заболеваний, как денге, желтая лихорадка, чикунгунья и Зика.2 Трансмиссивные заболевания связаны с каждой шестой инфекцией в мире, при этом комары являются основной причиной смерти. важные случаи3,4.Culex, Anopheles и Aedes — три рода комаров, которые чаще всего связаны с передачей заболеваний5.Распространенность лихорадки денге, инфекции, передаваемой комарами Aedes aegypti, за последнее десятилетие возросла и представляет значительную угрозу общественному здравоохранению4,7,8.По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), более 40% населения мира подвержено риску лихорадки денге, при этом ежегодно регистрируется 50–100 миллионов новых случаев в более чем 100 странах9,10,11.Лихорадка денге стала серьезной проблемой общественного здравоохранения, поскольку ее заболеваемость возросла во всем мире12,13,14.Anopheles gambiae, широко известный как африканский комар Anopheles, является наиболее важным переносчиком малярии человека в тропических и субтропических регионах15.Вирус Западного Нила, энцефалит Сент-Луиса, японский энцефалит и вирусные инфекции лошадей и птиц передаются комарами Culex, часто называемыми обычными домашними комарами.Кроме того, они также являются переносчиками бактериальных и паразитарных заболеваний16.В мире насчитывается более 3000 видов термитов, и они существуют уже более 150 миллионов лет17.Большинство вредителей живут в почве и питаются древесиной и изделиями из древесины, содержащими целлюлозу.Индийский термит Odontotermes obesus является важным вредителем, который наносит серьезный ущерб важным сельскохозяйственным культурам и плантационным деревьям18.В сельскохозяйственных районах заражение термитами на различных стадиях может нанести огромный экономический ущерб различным сельскохозяйственным культурам, породам деревьев и строительным материалам.Термиты также могут вызывать проблемы со здоровьем человека19.
Проблема устойчивости микроорганизмов и вредителей в современной фармацевтической и сельскохозяйственной сферах является сложной20,21.Поэтому обеим компаниям следует искать новые экономически эффективные противомикробные препараты и безопасные биопестициды.В настоящее время доступны синтетические пестициды, которые, как было доказано, являются инфекционными и отпугивают нецелевых полезных насекомых22.В последние годы исследования биосурфактантов расширились за счет их применения в различных отраслях промышленности.Биосурфактанты очень полезны и жизненно необходимы в сельском хозяйстве, восстановлении почв, добыче нефти, удалении бактерий и насекомых, а также в пищевой промышленности23,24.Биосурфактанты или микробные поверхностно-активные вещества представляют собой химические вещества-биосурфактанты, вырабатываемые микроорганизмами, такими как бактерии, дрожжи и грибы, в прибрежных средах обитания и загрязненных нефтью районах25,26.Поверхностно-активные вещества химического происхождения и биосурфактанты представляют собой два типа, которые получают непосредственно из природной среды27.Различные биосурфактанты получают из морской среды обитания28,29.Поэтому ученые ищут новые технологии производства биосурфактантов на основе природных бактерий30,31.Достижения в таких исследованиях демонстрируют важность этих биологических соединений для защиты окружающей среды32.Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium и эти роды бактерий являются хорошо изученными представителями23,33.
Существует множество типов биосурфактантов с широким спектром применения34.Существенным преимуществом этих соединений является то, что некоторые из них обладают антибактериальной, ларвицидной и инсектицидной активностью.Это означает, что их можно использовать в сельскохозяйственной, химической, фармацевтической и косметической промышленности35,36,37,38.Поскольку биосурфактанты, как правило, биоразлагаемы и экологически полезны, они используются в комплексных программах борьбы с вредителями для защиты сельскохозяйственных культур39.Таким образом, получены фундаментальные знания о ларвицидной и антитермитной активности микробных биосурфактантов, продуцируемых Enterobacter cloacae SJ2.Мы исследовали смертность и гистологические изменения при воздействии различных концентраций рамнолипидных биосурфактантов.Кроме того, мы оценили широко используемую компьютерную программу «Количественная структура-активность» (QSAR) «Экологическая структура-активность» (ECOSAR) для определения острой токсичности для микроводорослей, дафний и рыб.
В этом исследовании антитермитная активность (токсичность) очищенных биосурфактантов в различных концентрациях от 30 до 50 мг/мл (с интервалом 5 мг/мл) была протестирована против индийских термитов, O. obesus и четвертого вида )Evaluate.Личинки возраста Cx.Личинки комаров quinquefasciatus.Концентрации биосурфактанта LC50 в течение 48 часов против O. obesus и Cx.C. solanacearum.Личинки комаров идентифицировали с использованием метода аппроксимации кривой нелинейной регрессии.Результаты показали, что смертность термитов увеличивается с увеличением концентрации биосурфактанта.Результаты показали, что биосурфактант обладал ларвицидной активностью (рисунок 1) и антитермитной активностью (рисунок 2), при этом 48-часовые значения LC50 (95% ДИ) составляли 26,49 мг/л (от 25,40 до 27,57 ) и 33,43 мг/л. l (рис. 31,09-35,68) соответственно (табл. 1).По острой токсичности (48 часов) биосурфактант относится к категории «вредных» для тестируемых организмов.Биосурфактант, полученный в этом исследовании, показал превосходную ларвицидную активность со 100% смертностью в течение 24-48 часов после воздействия.
Рассчитайте значение LC50 для ларвицидной активности.Подбор кривой нелинейной регрессии (сплошная линия) и 95% доверительный интервал (заштрихованная область) для относительной смертности (%).
Рассчитайте значение LC50 для антитермитной активности.Подбор кривой нелинейной регрессии (сплошная линия) и 95% доверительный интервал (заштрихованная область) для относительной смертности (%).
В конце эксперимента под микроскопом наблюдались морфологические изменения и аномалии.Морфологические изменения наблюдались в контрольной и обработанной группах при 40-кратном увеличении.Как показано на рисунке 3, нарушение роста наблюдалось у большинства личинок, обработанных биосурфактантами.На рисунке 3а показан нормальный Cx.quinquefasciatus, на рис. 3б показан аномальный Cx.Вызывает пять личинок нематод.
Влияние сублетальных (LC50) доз биосурфактантов на развитие личинок Culex quinquefasciatus.Изображение световой микроскопии (а) нормального Cx при 40-кратном увеличении.quinquefasciatus (b) Аномальный Cx.Вызывает пять личинок нематод.
В настоящем исследовании гистологическое исследование обработанных личинок (рис. 4) и термитов (рис. 5) выявило несколько аномалий, включая уменьшение площади живота и повреждение мышц, слоев эпителия и кожи.средняя кишка.Гистология выявила механизм ингибирующей активности биосурфактанта, использованного в данном исследовании.
Гистопатология нормальных необработанных личинок Cx 4-го возраста.quinquefasciatus larvae (контроль: (a,b)) и обработаны биосурфактантом (обработка: (c,d)).Стрелки указывают обработанный кишечный эпителий (эпи), ядра (n) и мышцы (мю).Бар = 50 мкм.
Гистопатология нормального необработанного O. obesus (контроль: (a,b)) и обработанного биосурфактантом (обработка: (c,d)).Стрелки указывают кишечный эпителий (эпи) и мышцу (мю) соответственно.Бар = 50 мкм.
В этом исследовании ECOSAR использовался для прогнозирования острой токсичности продуктов рамнолипидного биосурфактанта для первичных продуцентов (зеленые водоросли), первичных потребителей (водяные блохи) и вторичных потребителей (рыбы).Эта программа использует сложные количественные модели соединений «структура-активность» для оценки токсичности на основе молекулярной структуры.Модель использует программное обеспечение «структура-активность» (SAR) для расчета острой и долгосрочной токсичности веществ для водных видов.В частности, в Таблице 2 суммированы расчетные средние летальные концентрации (LC50) и средние эффективные концентрации (EC50) для нескольких видов.Предполагаемая токсичность была разделена на четыре уровня с использованием Согласованной на глобальном уровне системы классификации и маркировки химических веществ (Таблица 3).
Борьба с трансмиссивными болезнями, особенно штаммами комаров и комаров Aedes.Египтяне, сейчас сложная работа 40,41,42,43,44,45,46.Хотя некоторые химически доступные пестициды, такие как пиретроиды и органофосфаты, в некоторой степени полезны, они представляют значительный риск для здоровья человека, включая диабет, репродуктивные расстройства, неврологические расстройства, рак и респираторные заболевания.Более того, со временем эти насекомые могут стать к ним устойчивыми13,43,48.Таким образом, эффективные и экологически чистые меры биологического контроля станут более популярным методом борьбы с комарами49,50.Бенелли51 предположил, что ранняя борьба с комарами-переносчиками будет более эффективной в городских районах, но они не рекомендовали использовать ларвициды в сельской местности52.Том и др. 53 также предположили, что борьба с комарами на их неполовозрелых стадиях будет безопасной и простой стратегией, поскольку они более чувствительны к агентам борьбы 54 .
Производство биосурфактанта мощным штаммом (Enterobacter cloacae SJ2) показало устойчивую и многообещающую эффективность.В нашем предыдущем исследовании сообщалось, что Enterobacter cloacae SJ2 оптимизирует выработку биосурфактантов с использованием физико-химических параметров26.Согласно их исследованию, оптимальными условиями для производства биосурфактанта потенциальным изолятом E. cloacae были инкубация в течение 36 часов, перемешивание при 150 об/мин, pH 7,5, 37 °C, соленость 1 ppt, 2% глюкозы в качестве источника углерода, 1% дрожжей. .экстракт использовали в качестве источника азота для получения биосурфактанта с концентрацией 2,61 г/л.Кроме того, биосурфактанты были охарактеризованы с помощью ТСХ, FTIR и MALDI-TOF-MS.Это подтвердило, что рамнолипид является биосурфактантом.Гликолипидные биосурфактанты являются наиболее интенсивно изучаемым классом других типов биосурфактантов55.Они состоят из углеводной и липидной частей, преимущественно цепей жирных кислот.Среди гликолипидов основными представителями являются рамнолипид и софоролипид56.Рамнолипиды содержат два рамнозных фрагмента, связанных с моно- или ди-β-гидроксидекановой кислотой 57 .Использование рамнолипидов в медицинской и фармацевтической промышленности хорошо известно 58 , в дополнение к их недавнему использованию в качестве пестицидов 59 .
Взаимодействие биосурфактанта с гидрофобной областью дыхательного сифона позволяет воде проходить через его устьичную полость, тем самым увеличивая контакт личинок с водной средой.Наличие биосурфактантов влияет и на трахею, длина которой близка к поверхности, что облегчает личинкам выползание на поверхность и дыхание.В результате поверхностное натяжение воды уменьшается.Поскольку личинки не могут прикрепиться к поверхности воды, они падают на дно резервуара, нарушая гидростатическое давление, что приводит к чрезмерным затратам энергии и гибели в результате утопления38,60.Аналогичные результаты были получены Ghribi61, где биосурфактант, продуцируемый Bacillus subtilis, проявлял ларвицидную активность против Ephestia kuehniella.Аналогично ларвицидная активность Cx.Дас и Мукерджи23 также оценили влияние циклических липопептидов на личинок quinquefasciatus.
Результаты настоящего исследования касаются ларвицидной активности рамнолипидных биосурфактантов в отношении Cx.Уничтожение комаров quinquefasciatus соответствует ранее опубликованным результатам.Например, используются биосурфактанты на основе сурфактина, продуцируемые различными бактериями рода Bacillus.и виды Pseudomonas.В некоторых ранних сообщениях64,65,66 сообщалось об активности липопептидных биосурфактантов Bacillus subtilis, убивающей личинки23.Дипали и др.63 обнаружили, что рамнолипидный биосурфактант, выделенный из Stenotropomonasmaltophilia, обладает мощной ларвицидной активностью в концентрации 10 мг/л.Сильва и др.67 сообщили о ларвицидной активности рамнолипидного биосурфактанта в отношении Ае в концентрации 1 г/л.Aedes aegypti.Канакданде и др.68 сообщили, что липопептидные биосурфактанты, продуцируемые Bacillus subtilis, вызывают общую смертность личинок Culex и термитов с липофильной фракцией эвкалипта.Аналогично, Масендра и др.69 сообщили о смертности рабочих муравьев (Cryptotermes cynocephalus Light.) на уровне 61,7% в липофильных фракциях н-гексана и EtOAc сырого экстракта E..
Партипан и др. 70 сообщили об инсектицидном использовании липопептидных биосурфактантов, продуцируемых Bacillus subtilis A1 и Pseudomonas stutzeri NA3, против Anopheles Stephensi, переносчика малярийного паразита Plasmodium.Они заметили, что личинки и куколки выживали дольше, имели более короткие периоды откладки яиц, были стерильными и имели меньшую продолжительность жизни при обработке различными концентрациями биосурфактантов.Наблюдаемые значения LC50 биосурфактанта A1 B. subtilis составляли 3,58, 4,92, 5,37, 7,10 и 7,99 мг/л для различных личиночных состояний (т.е. личинок I, II, III, IV и стадии куколки) соответственно.Для сравнения, биосурфактанты для личиночных стадий I-IV и куколочных стадий Pseudomonas stutzeri NA3 составляли 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 и 6,99 мг/л соответственно.Считается, что задержка фенологии выживших личинок и куколок является результатом значительных физиологических и метаболических нарушений, вызванных обработкой инсектицидами71.
Штамм Wickerhamomyces anomalus CCMA 0358 производит биосурфактант со 100% ларвицидной активностью в отношении комаров рода Aedes.aegypti 24-часовой интервал 38 был выше, чем сообщалось Silva et al.Было показано, что биосурфактант, полученный из Pseudomonas aeruginosa с использованием подсолнечного масла в качестве источника углерода, убивает 100% личинок в течение 48 часов 67 .Abinaya et al.72 и Pradhan et al.73 также продемонстрировали ларвицидное или инсектицидное действие поверхностно-активных веществ, продуцируемых несколькими изолятами рода Bacillus.Ранее опубликованное исследование Senthil-Nathan et al.обнаружили, что 100% личинок комаров, попавших в лагуны с растениями, скорее всего, погибнут.74.
Оценка сублетального воздействия инсектицидов на биологию насекомых имеет решающее значение для комплексных программ борьбы с вредителями, поскольку сублетальные дозы/концентрации не убивают насекомых, но могут сократить популяции насекомых в будущих поколениях за счет нарушения биологических характеристик10.Siqueira et al 75 наблюдали полную ларвицидную активность (100% смертность) рамнолипидного биосурфактанта (300 мг/мл) при тестировании в различных концентрациях от 50 до 300 мг/мл.Личиночная стадия штаммов Aedes aegypti.Они проанализировали влияние времени до смерти и сублетальных концентраций на выживаемость личинок и плавательную активность.Кроме того, они наблюдали снижение скорости плавания после 24–48 часов воздействия сублетальных концентраций биосурфактанта (например, 50 мг/мл и 100 мг/мл).Считается, что яды, обладающие многообещающим сублетальным действием, более эффективны в нанесении множественного ущерба подвергшимся воздействию вредителям76.
Гистологические наблюдения наших результатов показывают, что биосурфактанты, продуцируемые Enterobacter cloacae SJ2, значительно изменяют ткани личинок комаров (Cx. quinquefasciatus) и термитов (O. obesus).Подобные аномалии вызывали препараты базиликового масла в An.gambiaes.s и Ан.arabica были описаны Ochola77.Камарадж и др.78 также описали такие же морфологические аномалии у An.Личинки Стефани подверглись воздействию наночастиц золота.Васанта-Сринивасан и др.79 также сообщили, что эфирное масло пастушьей сумки серьезно повредило камеру и эпителиальные слои Aedes albopictus.Aedes aegypti.Рагхавендран и др. сообщили, что личинки комаров обрабатывались 500 мг/мл мицелиального экстракта местного гриба Penicillium.Ae показывают серьезные гистологические повреждения.aegypti и Cx.Уровень смертности 80. Ранее Abinaya et al.Изучены личинки An четвертого возраста.Стефенси и Ае.aegypti обнаружила многочисленные гистологические изменения у Aedes aegypti, обработанных экзополисахаридами B. licheniformis, включая слепую кишку желудка, атрофию мышц, повреждение и дезорганизацию ганглиев нервных шнуров72.По данным Raghavendran et al., после обработки мицелиальным экстрактом P. daleae в клетках средней кишки тестируемых комаров (личинки 4-го возраста) наблюдалось набухание просвета кишечника, уменьшение межклеточного содержимого и ядерная дегенерация81.Те же гистологические изменения наблюдались у личинок комаров, обработанных экстрактом листьев эхинацеи, что указывает на инсектицидный потенциал обработанных соединений50.
Использование программного обеспечения ECOSAR получило международное признание82.Текущие исследования показывают, что острая токсичность биосурфактантов ECOSAR для микроводорослей (C. vulgaris), рыб и водяных блох (D. magna) подпадает под категорию «токсичности», определенную Организацией Объединенных Наций83.Модель экотоксичности ECOSAR использует SAR и QSAR для прогнозирования острой и долгосрочной токсичности веществ и часто используется для прогнозирования токсичности органических загрязнителей82,84.
Параформальдегид, натрий-фосфатный буфер (рН 7,4) и все другие химические вещества, использованные в этом исследовании, были приобретены у HiMedia Laboratories, Индия.
Производство биосурфактанта осуществляли в колбах Эрленмейера емкостью 500 мл, содержащих 200 мл стерильной среды Бушнелла Хааса с добавлением 1% сырой нефти в качестве единственного источника углерода.Прекультуру Enterobacter cloacae SJ2 (1,4 × 104 КОЕ/мл) инокулировали и культивировали на орбитальном шейкере при 37°C, 200 об/мин в течение 7 дней.После периода инкубации биосурфактант экстрагировали центрифугированием культуральной среды при 3400×g в течение 20 минут при 4°C и полученный супернатант использовали для целей скрининга.Процедуры оптимизации и характеристики биосурфактантов были взяты из нашего более раннего исследования26.
Личинки Culex quinquefasciatus были получены из Центра перспективных исследований морской биологии (CAS), Паланчипетай, Тамил Наду (Индия).Личинок выращивали в пластиковых контейнерах, наполненных деионизированной водой при температуре 27 ± 2°С и фотопериоде 12:12 (свет:темнота).Личинкам комаров скармливали 10% раствор глюкозы.
Личинки Culex quinquefasciatus были обнаружены в открытых и незащищенных септиках.Используйте стандартные рекомендации по классификации для идентификации и культивирования личинок в лаборатории85.Ларвицидные испытания проводились в соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения 86 .Ш.Личинок quinquefasciatus четвертого возраста собирали в закрытые пробирки группами по 25 мл и 50 мл с воздушным зазором в две трети их вместимости.Биосурфактант (0–50 мг/мл) добавляли в каждую пробирку индивидуально и хранили при 25 °С.В контрольной пробирке использовалась только дистиллированная вода (50 мл).Мертвыми личинками считались те личинки, которые не проявляли признаков плавания в течение инкубационного периода (12–48 часов) 87 .Рассчитайте процент смертности личинок, используя уравнение.(1)88.
Семейство Odontotermitidae включает индийского термита Odontotermes obesus, обнаруженного в гниющих бревнах сельскохозяйственного кампуса (Университет Аннамалай, Индия).Проверьте это биосурфактант (0–50 мг/мл), используя обычные процедуры, чтобы определить, вредно ли оно.После сушки в ламинарном потоке воздуха в течение 30 мин каждую полоску ватмана покрывали биосурфактантом в концентрации 30, 40 или 50 мг/мл.Бумажные полоски с предварительно покрытием и без покрытия тестировали и сравнивали в центре чашки Петри.В каждой чашке Петри содержится около тридцати активных термитов O. obesus.Контрольным и экспериментальным термитам в качестве источника пищи давали влажную бумагу.Все чашки хранили при комнатной температуре в течение всего периода инкубации.Термиты погибли через 12, 24, 36 и 48 часов89,90.Затем уравнение 1 использовалось для оценки процента смертности термитов при различных концентрациях биосурфактанта.(2).
Образцы хранили на льду, упаковывали в микропробирки, содержащие 100 мл 0,1 М натрий-фосфатного буфера (рН 7,4), и отправляли в Центральную лабораторию патологии аквакультуры (CAPL) Центра аквакультуры имени Раджива Ганди (RGCA).Гистологическая лаборатория, Сиркали, Майиладутурай.Район, Тамил Наду, Индия, для дальнейшего анализа.Образцы немедленно фиксировали в 4%-ном параформальдегиде при температуре 37°С в течение 48 часов.
После фазы фиксации материал трижды промывали 0,1 М натрий-фосфатным буфером (рН 7,4), поэтапно обезвоживали в этаноле и замачивали в смоле LEICA на 7 дней.Затем вещество помещают в пластиковую форму, наполненную смолой и полимеризатором, а затем помещают в печь, нагретую до 37°С, до полной полимеризации блока, содержащего вещество.
После полимеризации блоки разрезали с помощью микротома LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, США) до толщины 3 мм.Разделы сгруппированы на слайдах, по шесть разделов на слайд.Слайды высушивали при комнатной температуре, затем окрашивали гематоксилином в течение 7 мин и промывали проточной водой в течение 4 мин.Кроме того, раствор эозина нанести на кожу на 5 минут и смыть проточной водой в течение 5 минут.
Острая токсичность была предсказана с использованием водных организмов с разных тропических уровней: 96-часовая рыба LC50, 48-часовая D. magna LC50 и 96-часовая зеленая водоросль EC50.Токсичность рамнолипидных биосурфактантов для рыб и зеленых водорослей оценивали с использованием программного обеспечения ECOSAR версии 2.2 для Windows, разработанного Агентством по охране окружающей среды США.(Доступно онлайн по адресу https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Все тесты на ларвицидную и антитермитную активность проводили в трехкратной повторности.Нелинейную регрессию (логарифм переменных «доза-эффект») данных о смертности личинок и термитов проводили для расчета медианной летальной концентрации (LC50) с 95% доверительным интервалом, а кривые концентрации-эффекта были построены с использованием Prism® (версия 8.0, GraphPad Software) Inc., США) 84, 91.
Настоящее исследование раскрывает потенциал микробных биосурфактантов, продуцируемых Enterobacter cloacae SJ2, в качестве ларвицидных и антитермитных агентов комаров, и эта работа будет способствовать лучшему пониманию механизмов ларвицидного и антитермитного действия.Гистологические исследования личинок, обработанных биосурфактантами, выявили повреждение пищеварительного тракта, средней кишки, коры головного мозга и гиперплазию эпителиальных клеток кишечника.Результаты: Токсикологическая оценка антитермитной и ларвицидной активности рамнолипидного биосурфактанта, продуцируемого Enterobacter cloacae SJ2, показала, что этот изолят является потенциальным биопестицидом для борьбы с трансмиссивными болезнями комаров (Cx quinquefasciatus) и термитов (O. obesus).Существует необходимость понять основную экологическую токсичность биосурфактантов и их потенциальное воздействие на окружающую среду.Это исследование обеспечивает научную основу для оценки экологического риска биосурфактантов.
Время публикации: 09 апреля 2024 г.