Широкое использование синтетических пестицидов привело к множеству проблем, включая появление резистентных организмов, ухудшение состояния окружающей среды и вред для здоровья человека. Поэтому новые микробныепестицидыСрочно необходимы безопасные для здоровья человека и окружающей среды биосурфактанты. В данном исследовании рамнолипидный биосурфактант, продуцируемый Enterobacter cloacae SJ2, использовался для оценки токсичности для личинок комаров (Culex quinquefasciatus) и термитов (Odontotermes obesus). Результаты показали, что уровень смертности зависит от дозы при разных обработках. Значение LC50 (50% летальная концентрация) через 48 часов для биосурфактантов для личинок термитов и комаров определялось методом аппроксимации кривой нелинейной регрессии. Результаты показали, что 48-часовые значения LC50 (95% доверительный интервал) ларвицидной и противотермитной активности биосурфактанта составили 26,49 мг/л (диапазон 25,40–27,57) и 33,43 мг/л (диапазон 31,09–35,68) соответственно. Согласно гистопатологическому исследованию, обработка биосурфактантами вызывала серьёзные повреждения тканей органелл личинок и термитов. Результаты данного исследования свидетельствуют о том, что микробный биосурфактант, продуцируемый Enterobacter cloacae SJ2, является превосходным и потенциально эффективным средством для борьбы с Cx. quinquefasciatus и O. obesus.
В тропических странах наблюдается большое количество заболеваний, переносимых комарами1. Актуальность заболеваний, переносимых комарами, широко распространена. Ежегодно от малярии умирает более 400 000 человек, а в некоторых крупных городах наблюдаются эпидемии серьезных заболеваний, таких как лихорадка денге, желтая лихорадка, чикунгунья и Зика2. Трансмиссивные заболевания связаны с каждой шестой инфекцией в мире, причем комары вызывают наиболее серьезные случаи3,4. Culex, Anopheles и Aedes — три рода комаров, наиболее часто связанных с передачей болезней5. Распространенность лихорадки денге, инфекции, передаваемой комарами Aedes aegypti, возросла за последнее десятилетие и представляет собой значительную угрозу общественному здравоохранению4,7,8. По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), более 40% населения мира подвержено риску лихорадки денге, причем ежегодно в более чем 100 странах регистрируется 50–100 миллионов новых случаев9,10,11. Лихорадка денге стала серьезной проблемой общественного здравоохранения, поскольку ее заболеваемость возросла во всем мире12,13,14. Anopheles gambiae, широко известный как африканский комар Anopheles, является важнейшим переносчиком малярии человека в тропических и субтропических регионах15. Вирус Западного Нила, энцефалит Сент-Луиса, японский энцефалит и вирусные инфекции лошадей и птиц передаются комарами Culex, которых часто называют обычными домашними комарами. Кроме того, они также являются переносчиками бактериальных и паразитарных заболеваний16. В мире существует более 3000 видов термитов, и они существуют уже более 150 миллионов лет17. Большинство вредителей обитают в почве и питаются древесиной и древесными продуктами, содержащими целлюлозу. Индийский термит Odontotermes obesus является серьезным вредителем, наносящим серьезный ущерб важным сельскохозяйственным культурам и плантационным деревьям18. В сельскохозяйственных районах заражение термитами на разных стадиях может нанести огромный экономический ущерб различным сельскохозяйственным культурам, породам деревьев и строительным материалам. Термиты также могут вызывать проблемы со здоровьем у человека19.
Проблема резистентности микроорганизмов и вредителей в современных фармацевтических и сельскохозяйственных областях является сложной20,21. Поэтому обе компании должны искать новые экономически эффективные противомикробные препараты и безопасные биопестициды. Синтетические пестициды теперь доступны и, как было показано, являются инфекционными и отпугивают нецелевых полезных насекомых22. В последние годы исследования биосурфактантов расширились в связи с их применением в различных отраслях промышленности. Биосурфактанты очень полезны и жизненно важны в сельском хозяйстве, рекультивации почв, добыче нефти, удалении бактерий и насекомых, а также в пищевой промышленности23,24. Биосурфактанты или микробные поверхностно-активные вещества - это химические биосурфактанты, продуцируемые микроорганизмами, такими как бактерии, дрожжи и грибы, в прибрежных местообитаниях и на территориях, загрязненных нефтью25,26. Химически полученные поверхностно-активные вещества и биосурфактанты - это два типа, которые получают непосредственно из природной среды27. Различные биосурфактанты получают из морских местообитаний28,29. Поэтому учёные ищут новые технологии производства биосурфактантов на основе природных бактерий30,31. Достижения в таких исследованиях демонстрируют важность этих биологических соединений для защиты окружающей среды32. Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium и другие роды бактерий являются хорошо изученными представителями23,33.
Существует множество типов биосурфактантов с широким спектром применения34. Значительным преимуществом этих соединений является то, что некоторые из них обладают антибактериальной, ларвицидной и инсектицидной активностью. Это означает, что они могут использоваться в сельскохозяйственной, химической, фармацевтической и косметической промышленности35,36,37,38. Поскольку биосурфактанты, как правило, биоразлагаемы и экологически безопасны, их используют в комплексных программах борьбы с вредителями для защиты сельскохозяйственных культур39. Таким образом, были получены базовые знания о ларвицидной и противотермитной активности микробных биосурфактантов, продуцируемых Enterobacter cloacae SJ2. Мы исследовали смертность и гистологические изменения при воздействии различных концентраций рамнолипидных биосурфактантов. Кроме того, мы оценили широко используемую компьютерную программу Quantitative Structure-Activity (QSAR) Ecological Structure-Activity (ECOSAR) для определения острой токсичности для микроводорослей, дафний и рыб.
В данном исследовании была исследована противотермитная активность (токсичность) очищенных биосурфактантов в различных концентрациях от 30 до 50 мг/мл (с шагом 5 мг/мл) в отношении индийских термитов, O. obesus и четвертого вида (оценка). Личинки стадии Cx. Личинки комаров quinquefasciatus. Концентрации биосурфактанта LC50 в течение 48 часов против O. obesus и Cx. C. solanacearum. Личинки комаров были идентифицированы методом нелинейной регрессионной аппроксимации. Результаты показали, что смертность термитов увеличивалась с увеличением концентрации биосурфактанта. Результаты показали, что биосурфактант обладает ларвицидной (рисунок 1) и противотермитной (рисунок 2) активностью, с 48-часовыми значениями LC50 (95% ДИ) 26,49 мг/л (25,40–27,57) и 33,43 мг/л (рисунок 31,09–35,68) соответственно (таблица 1). С точки зрения острой токсичности (48 часов) биосурфактант классифицируется как «вредный» для тестируемых организмов. Биосурфактант, полученный в данном исследовании, продемонстрировал превосходную ларвицидную активность со 100% гибелью в течение 24–48 часов после воздействия.
Рассчитайте значение LC50 для ларвицидной активности. Кривая нелинейной регрессии (сплошная линия) и 95% доверительный интервал (заштрихованная область) для относительной смертности (%).
Рассчитайте значение LC50 для противотермитной активности. Кривая нелинейной регрессии (сплошная линия) и 95% доверительный интервал (заштрихованная область) для относительной смертности (%).
В конце эксперимента морфологические изменения и аномалии наблюдались под микроскопом. Морфологические изменения наблюдались в контрольной и обработанной группах при 40-кратном увеличении. Как показано на рисунке 3, у большинства личинок, обработанных биосурфактантами, наблюдалось нарушение роста. На рисунке 3а показана нормальная особь Cx. quinquefasciatus, на рисунке 3б – аномальная Cx. Вызывает пять личинок нематод.
Влияние сублетальных (LC50) доз биосурфактантов на развитие личинок Culex quinquefasciatus. Изображение, полученное с помощью светового микроскопа (a) – нормальный Cx при 40-кратном увеличении. quinquefasciatus (b) – аномальный Cx. Вызывает развитие пяти личинок нематод.
В настоящем исследовании гистологическое исследование обработанных личинок (рис. 4) и термитов (рис. 5) выявило ряд отклонений, включая уменьшение площади брюшной полости и повреждение мышц, эпителиальных слоёв и кожи. Гистологическое исследование выявило механизм ингибирующего действия биосурфактанта, использованного в данном исследовании.
Гистопатология нормальных нелеченых личинок Cx 4-й стадии. Личинки quinquefasciatus (контроль: (a, b)) и личинки, обработанные биосурфактантом (обработка: (c, d)). Стрелки указывают на обработанный кишечный эпителий (epi), ядро (n) и мышцу (mu). Линия = 50 мкм.
Гистопатология нормальных нелеченых O. obesus (контроль: (a, b)) и обработанных биосурфактантом (лечение: (c, d)). Стрелки указывают на кишечный эпителий (epi) и мышечную ткань (mu) соответственно. Линия = 50 мкм.
В данном исследовании программа ECOSAR использовалась для прогнозирования острой токсичности рамнолипидных биосурфактантов для первичных продуцентов (зелёных водорослей), первичных консументов (водяных блох) и вторичных консументов (рыб). Эта программа использует сложные количественные модели структуры-активности соединений для оценки токсичности на основе молекулярной структуры. Модель использует программное обеспечение для анализа структуры-активности (SAR) для расчёта острой и долгосрочной токсичности веществ для водных видов. В частности, в таблице 2 приведены предполагаемые средние летальные концентрации (LC50) и средние эффективные концентрации (EC50) для нескольких видов. Предполагаемая токсичность была классифицирована по четырём уровням с использованием Глобально согласованной системы классификации и маркировки химических веществ (таблица 3).
Контроль трансмиссивных заболеваний, особенно штаммов комаров и комаров Aedes. Египтяне, теперь сложная работа 40,41,42,43,44,45,46. Хотя некоторые химически доступные пестициды, такие как пиретроиды и органофосфаты, в некоторой степени полезны, они представляют значительный риск для здоровья человека, включая диабет, репродуктивные нарушения, неврологические расстройства, рак и респираторные заболевания. Более того, со временем эти насекомые могут стать устойчивыми к ним13,43,48. Таким образом, эффективные и экологически безопасные меры биологического контроля станут более популярным методом борьбы с комарами49,50. Бенелли51 предположил, что ранний контроль комаров-переносчиков будет более эффективным в городских районах, но они не рекомендовали использовать ларвициды в сельской местности52. Том и др.53 также предположили, что борьба с комарами на их неполовозрелых стадиях будет безопасной и простой стратегией, поскольку они более чувствительны к средствам контроля54.
Продукция биосурфактанта мощным штаммом (Enterobacter cloacae SJ2) показала стабильную и многообещающую эффективность. В нашем предыдущем исследовании сообщалось, что Enterobacter cloacae SJ2 оптимизирует продукцию биосурфактанта, используя физико-химические параметры26. Согласно их исследованию, оптимальными условиями для продукции биосурфактанта потенциальным изолятом E. cloacae были инкубация в течение 36 часов, перемешивание при 150 об/мин, pH 7,5, 37 °C, соленость 1 ppt, 2% глюкозы в качестве источника углерода, 1% дрожжей. Экстракт использовался в качестве источника азота для получения 2,61 г/л биосурфактанта. Кроме того, биосурфактанты были охарактеризованы с помощью ТСХ, ИК-Фурье и МАЛДИ-времяпролетной масс-спектрометрии. Это подтвердило, что рамнолипид является биосурфактантом. Гликолипидные биосурфактанты являются наиболее интенсивно изучаемым классом других типов биосурфактантов55. Они состоят из углеводных и липидных частей, в основном цепей жирных кислот. Среди гликолипидов основными представителями являются рамнолипид и софоролипид56. Рамнолипиды содержат два остатка рамнозы, связанных с моно- или ди-β-гидроксидекановой кислотой57. Применение рамнолипидов в медицинской и фармацевтической промышленности хорошо известно58, помимо их недавнего применения в качестве пестицидов59.
Взаимодействие биосурфактанта с гидрофобной областью дыхательного сифона позволяет воде проходить через его устьичную полость, тем самым увеличивая контакт личинок с водной средой. Присутствие биосурфактантов также влияет на трахеи, длина которых близка к поверхности, что облегчает личинкам подползание к поверхности и дыхание. В результате поверхностное натяжение воды уменьшается. Поскольку личинки не могут прикрепиться к поверхности воды, они падают на дно резервуара, нарушая гидростатическое давление, что приводит к чрезмерному расходу энергии и гибели от утопления38,60. Аналогичные результаты были получены Ghribi61, где биосурфактант, продуцируемый Bacillus subtilis, проявил ларвицидную активность против Ephestia kuehniella. Аналогичным образом, ларвицидная активность Cx. Дас и Мукерджи23 также оценили влияние циклических липопептидов на личинки квинкефасциатуса.
Результаты данного исследования касаются ларвицидной активности рамнолипидных биосурфактантов против Cx. Уничтожение комаров quinquefasciatus согласуется с ранее опубликованными результатами. Например, используются биосурфактанты на основе сурфактина, продуцируемые различными бактериями рода Bacillus. и Pseudomonas spp. В некоторых ранних отчетах64,65,66 сообщалось о личиночной губительной активности липопептидных биосурфактантов из Bacillus subtilis23. Дипали и соавт.63 обнаружили, что рамнолипидный биосурфактант, выделенный из Stenotropomonas maltophilia, обладал мощной ларвицидной активностью в концентрации 10 мг/л. Сильва и соавт.67 сообщили о ларвицидной активности рамнолипидного биосурфактанта против Ae в концентрации 1 г/л. Aedes aegypti. Канакданде и соавт. В работе 68 сообщалось, что липопептидные биосурфактанты, продуцируемые Bacillus subtilis, вызывали общую гибель личинок Culex и термитов при использовании липофильной фракции эвкалипта. Аналогичным образом, в работе 69 сообщалось о смертности рабочих муравьев (Cryptotermes cynocephalus Light) в 61,7% липофильных фракций н-гексана и этилацетата в неочищенном экстракте E.
Партипан и др. (Parthipan et al., 70) сообщили об инсектицидном применении липопептидных биосурфактантов, продуцируемых Bacillus subtilis A1 и Pseudomonas stutzeri NA3, против Anopheles Stephensi, переносчика малярийного плазмодия. Они отметили, что личинки и куколки выживали дольше, имели более короткие периоды яйцекладки, были стерильными и имели более короткую продолжительность жизни при обработке различными концентрациями биосурфактантов. Наблюдаемые значения LC50 биосурфактанта B. subtilis A1 составили 3,58, 4,92, 5,37, 7,10 и 7,99 мг/л для различных личиночных стадий (т.е. личинки I, II, III, IV и стадии куколки) соответственно. Для сравнения, концентрация биосурфактантов для личиночных стадий I–IV и куколочных стадий Pseudomonas stutzeri NA3 составила 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 и 6,99 мг/л соответственно. Задержка фенологии выживших личинок и куколок, как полагают, является результатом значительных физиологических и метаболических нарушений, вызванных обработкой инсектицидами71.
Штамм Wickerhamomyces anomalus CCMA 0358 производит биосурфактант со 100% ларвицидной активностью против комаров Aedes. aegypti 24-часовой интервал 38 был выше, чем сообщали Сильва и др. Биосурфактант, полученный из Pseudomonas aeruginosa с использованием подсолнечного масла в качестве источника углерода, как было показано, убивает 100% личинок в течение 48 часов 67 . Абиная и др. 72 и Прадхан и др. 73 также продемонстрировали ларвицидное или инсектицидное действие поверхностно-активных веществ, продуцируемых несколькими изолятами рода Bacillus. Ранее опубликованное исследование Сентил-Натана и др. показало, что 100% личинок комаров, подвергшихся воздействию растительных лагун, вероятно, погибли. 74.
Оценка сублетальных эффектов инсектицидов на биологию насекомых имеет решающее значение для комплексных программ борьбы с вредителями, поскольку сублетальные дозы/концентрации не убивают насекомых, но могут сократить популяции насекомых в будущих поколениях за счет нарушения биологических характеристик10. Сикейра и др. 75 наблюдали полную ларвицидную активность (100% смертность) рамнолипидного биосурфактанта (300 мг/мл) при тестировании в различных концентрациях от 50 до 300 мг/мл. Личиночная стадия штаммов Aedes aegypti. Они проанализировали влияние времени до смерти и сублетальных концентраций на выживаемость личинок и их плавательную активность. Кроме того, они наблюдали снижение скорости плавания после 24–48 часов воздействия сублетальных концентраций биосурфактанта (например, 50 мг/мл и 100 мг/мл). Яды, которые имеют многообещающие сублетальные функции, считаются более эффективными в нанесении множественного ущерба подвергшимся воздействию вредителям76.
Гистологические наблюдения за нашими результатами показывают, что биосурфактанты, продуцируемые Enterobacter cloacae SJ2, значительно изменяют ткани личинок комаров (Cx. quinquefasciatus) и термитов (O. obesus). Аналогичные аномалии были вызваны препаратами базиликового масла у An. gambiaes.s и An. arabica, описанными Ochola77. Камарадж и др.78 также описали те же морфологические аномалии у An. Личинки Стефани были подвергнуты воздействию золотых наночастиц. Васанта-Сринивасан и др.79 также сообщили, что эфирное масло пастушьей сумки серьезно повредило камеру и эпителиальные слои Aedes albopictus. Aedes aegypti. Рагхавендран и др. сообщили, что личинки комаров были обработаны 500 мг/мл мицелиального экстракта местного гриба Penicillium. Ae показывают серьезные гистологические повреждения. aegypti и Cx. Коэффициент смертности 80. Ранее, Abinaya et al. Исследовались личинки An четвертой стадии. Stephensi и Ae. aegypti обнаружили многочисленные гистологические изменения у Aedes aegypti, обработанных экзополисахаридами B. licheniformis, включая слепую кишку желудка, атрофию мышц, повреждение и дезорганизацию ганглиев нервного ствола72. По данным Raghavendran et al., после обработки экстрактом мицелия P. daleae клетки средней кишки подопытных комаров (личинки четвертой стадии) показали отек просвета кишечника, уменьшение межклеточного содержимого и ядерную дегенерацию81. Такие же гистологические изменения наблюдались у личинок комаров, обработанных экстрактом листьев эхинацеи, что указывает на инсектицидный потенциал обработанных соединений50.
Использование программного обеспечения ECOSAR получило международное признание82. Современные исследования показывают, что острая токсичность биосурфактантов ECOSAR для микроводорослей (C. vulgaris), рыб и дафний (D. magna) попадает под категорию «токсичности», определенную Организацией Объединенных Наций83. Модель экотоксичности ECOSAR использует модели SAR и QSAR для прогнозирования острой и долгосрочной токсичности веществ и часто применяется для прогнозирования токсичности органических загрязнителей82,84.
Параформальдегид, натрий-фосфатный буфер (pH 7,4) и все другие химические вещества, использованные в данном исследовании, были приобретены в HiMedia Laboratories, Индия.
Получение биосурфактанта осуществлялось в колбах Эрленмейера объёмом 500 мл, содержащих 200 мл стерильной среды Бушнелла-Хааса с добавлением 1% сырой нефти в качестве единственного источника углерода. Предварительная культура Enterobacter cloacae SJ2 (1,4 × 104 КОЕ/мл) была инокулирована и культивировалась на орбитальном шейкере при 37°C и 200 об/мин в течение 7 дней. После инкубации биосурфактант экстрагировали центрифугированием питательной среды при 3400 g в течение 20 минут при 4°C, а полученный супернатант использовали для скрининга. Процедуры оптимизации и характеристики биосурфактантов были заимствованы из нашего предыдущего исследования26.
Личинки Culex quinquefasciatus были получены из Центра передовых исследований морской биологии (CAS), Палачинпитай, Тамилнад (Индия). Личинки выращивались в пластиковых контейнерах с деионизированной водой при температуре 27 ± 2°C и фотопериоде 12:12 (свет:темнота). Личинки комаров питались 10%-ным раствором глюкозы.
Личинки Culex quinquefasciatus были обнаружены в открытых и незащищенных септиках. Используйте стандартные руководящие принципы классификации для идентификации и культивирования личинок в лаборатории85. Ларвицидные испытания проводились в соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения86. SH. Личинки четвертой стадии quinquefasciatus были собраны в закрытые пробирки группами по 25 мл и 50 мл с воздушным зазором в две трети их объема. Биосурфактант (0–50 мг/мл) добавляли в каждую пробирку индивидуально и хранили при 25 °C. В контрольной пробирке использовали только дистиллированную воду (50 мл). Мертвыми считались личинки, которые не показывали признаков плавания в течение инкубационного периода (12–48 часов)87. Рассчитайте процент смертности личинок, используя уравнение. (1)88.
Семейство Odontotermitidae включает индийского термита Odontotermes obesus, обнаруженного в гниющих бревнах в Сельскохозяйственном кампусе (Университет Аннамалай, Индия). Испытайте этот биосурфактант (0–50 мг/мл) по обычным процедурам, чтобы определить, является ли он вредным. После сушки в ламинарном потоке воздуха в течение 30 минут, каждая полоска ватмана была покрыта биосурфактантом в концентрации 30, 40 или 50 мг/мл. Предварительно покрытые и непокрытые полоски бумаги были испытаны и сравнены в центре чашки Петри. Каждая чашка Петри содержит около тридцати активных термитов O. obesus. Контрольным и подопытным термитам давали влажную бумагу в качестве источника пищи. Все чашки содержались при комнатной температуре в течение всего периода инкубации. Термиты погибали через 12, 24, 36 и 48 часов89,90. Затем уравнение 1 использовалось для оценки процента смертности термитов при различных концентрациях биосурфактанта. (2).
Образцы хранили на льду, упаковывали в микропробирки, содержащие 100 мл 0,1 М натрий-фосфатного буфера (pH 7,4), и отправляли в Центральную лабораторию патологии аквакультуры (CAPL) Центра аквакультуры имени Раджива Ганди (RGCA). Гистологическая лаборатория, Сиркали, округ Майиладутурай, штат Тамилнад, Индия, для дальнейшего анализа. Образцы немедленно фиксировали в 4% растворе параформальдегида при температуре 37 °C в течение 48 часов.
После фазы фиксации материал трижды промывали 0,1 М натрий-фосфатным буфером (pH 7,4), поэтапно дегидратировали в этаноле и замачивали в смоле LEICA в течение 7 суток. Затем материал помещали в пластиковую форму, заполненную смолой и полимеризатором, и помещали в печь, нагретую до 37°C, до полной полимеризации блока с веществом.
После полимеризации блоки разрезали на микротоме LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, США) до толщины 3 мм. Срезы группировали на предметных стеклах по шесть срезов на каждое. Срезы высушивали при комнатной температуре, затем окрашивали гематоксилином в течение 7 минут и промывали проточной водой в течение 4 минут. Кроме того, на кожу наносили раствор эозина на 5 минут и промывали проточной водой в течение 5 минут.
Острая токсичность была спрогнозирована с использованием водных организмов из разных тропических зон: 96-часовая LC50 для рыб, 48-часовая LC50 для D. magna и 96-часовая EC50 для зелёных водорослей. Токсичность рамнолипидных биосурфактантов для рыб и зелёных водорослей оценивалась с помощью программного обеспечения ECOSAR версии 2.2 для Windows, разработанного Агентством по охране окружающей среды США. (Доступно онлайн по адресу https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Все испытания на ларвицидную и противотермитную активность проводились трижды. Для расчета медианной летальной концентрации (LC50) с 95% доверительным интервалом была проведена нелинейная регрессия (логарифмическая зависимость между дозой и реакцией) данных о смертности личинок и термитов. Кривые зависимости концентрации от реакции были построены с помощью программы Prism® (версия 8.0, GraphPad Software Inc., США) [84, 91].
Настоящее исследование раскрывает потенциал микробных биосурфактантов, продуцируемых Enterobacter cloacae SJ2, в качестве ларвицидных и противотермитных агентов, и эта работа будет способствовать лучшему пониманию механизмов ларвицидного и противотермитного действия. Гистологические исследования личинок, обработанных биосурфактантами, показали повреждение пищеварительного тракта, средней кишки, коры головного мозга и гиперплазию эпителиальных клеток кишечника. Результаты: Токсикологическая оценка противотермитной и ларвицидной активности рамнолипидного биосурфактанта, продуцируемого Enterobacter cloacae SJ2, показала, что этот изолят является потенциальным биопестицидом для борьбы с трансмиссивными заболеваниями комаров (Cx quinquefasciatus) и термитов (O. obesus). Необходимо понять лежащую в основе экологическую токсичность биосурфактантов и их потенциальное воздействие на окружающую среду. Данное исследование дает научную основу для оценки экологического риска биосурфактантов.
Время публикации: 09 апреля 2024 г.